電轉操作視頻

? ? ? ?自2019年9月9日HYY自主研發CellEasy^TM低電壓基因電轉儀上市以來，得到了廣大老師同學的熱烈反饋，紛紛打來電話咨詢電轉儀相關事項。講座預約不斷，今天HYY的科研小伙伴用心為大家帶來了關于細胞電轉的操作視頻及細胞電轉詳細步驟。電轉儀我們一起用起來吧！

一、操作步驟

檢測前準備工作

試劑耗材：

細胞培養基DMEM或1640、FBS、0.25%胰蛋白酶 (自配，無菌)、PBS (自配，無菌)、電轉緩沖液。

測試細胞：根據實驗分組提前準備好電轉需要用到的細胞，每個電轉杯需要1×10⁶個細胞。

其他準備：用具準備電轉儀器、電轉杯（1mm）、電轉液、毛細管槍頭、6孔板、倒置熒光顯微鏡、移液器。

二、細胞實驗流程

1、細胞消化，用PBS處理成細胞懸液，計數，離心（1000rpm，5min）棄PBS；

2、850ul電轉液重懸107cells，每個電轉杯加入的細胞懸液約85uL；

3、細胞懸液中加入質粒8.5ug(終濃度10ug/mL），混勻；

4、毛細管槍頭移取85ul到電轉杯，從底部加入，保證沒有氣泡，氣泡會影響電轉效果；

5、調好儀器參數，逐個電轉，電轉結束后迅速加入少量培養基；

6、六孔板中提前加入2ml完全培養基，電轉細胞懸液吸出加入到孔板，37℃培養箱靜置培養24-48h，觀察熒光蛋白表達，計算電轉效率；電轉后第2天觀察細胞存活率；

7、依次操作完上述所有樣品；

8、收拾臺面，電轉杯及時清洗，儀器歸位。

三、說明書