一、實驗準備
1.儀器準備：電轉儀器、離心機、恒溫搖床、恒溫培養箱。
2.耗材試劑準備：電轉杯、電轉液、槍頭、帶抗性LB平板、SOC培養基、1.5mL EP管、錐形瓶、待電轉質粒。

二、實驗流程
1.大腸桿菌（DH5a）接菌（1:100）到5mL 無抗LB培養基/SOC培養基，搖菌6-8h，直至對數期生長。（OD600：0.7-1.0）
2.用6600 rpm/min x 5min收集活菌沉淀。
3.CellEasy電轉液重懸，洗兩遍。6600 rpm/min x 2min。用1mL電轉液重懸細菌，可分裝10管，0.1mL/管，備用。
4.1ug質粒和0.1mL菌液混勻。電轉質粒濃度最好10ug/mL以上。
5.移取85ul混合液與1mm電轉管中，按細菌電轉實驗參數進行設置（細菌電轉：800-1200V，5ms）
6.電轉完畢后，取出電轉杯，加入2mL 預冷SOC培養，緩慢重懸，移至
? 新的1.5mL EP管中。
7.37度恒溫搖床，200rpm/min，培養30-45min。
8.取適量菌液涂板。（可選：瞬離后，移取部分培養基，重懸100-200uL體積重懸菌液，涂布于帶有質粒相應抗性的LB平板中）
9.37度恒溫培養箱靜止培養過夜。（12-16小時）

細菌電轉實驗.pdf